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淺談液相色譜法及其與氣相色譜法的區(qū)別

更新日期: 2016-02-17
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液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。

  液相色譜法

  特指一種用液體為流動(dòng)相的色譜分離分析方法。它在經(jīng)典色譜理論的基礎(chǔ)上,采用了高壓泵、化學(xué)鍵合固定相分離柱、高靈敏檢測(cè)器等新實(shí)驗(yàn)技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。

  高壓:150-350*105 Pa

  :大于30000塔板/米

  高靈敏:10-9g (紫外檢測(cè))、10-11g (熒光檢測(cè))

  液相色譜儀與氣相色譜儀的區(qū)別:

  1、分析對(duì)象的區(qū)別

  GC:適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品;但對(duì)高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、 熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品,尤其對(duì)大多數(shù)生化樣品不可檢測(cè) 占有機(jī)物的20%

  HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機(jī)介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,對(duì)分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測(cè) 用途廣泛,占有機(jī)物的80%

  2、流動(dòng)相差別的區(qū)別

  GC:流動(dòng)相為惰性,氣體組分與流動(dòng)相無親合作用力,只與固定相有相互作用。

  HPLC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對(duì)分離起正向作用。且流動(dòng)相種類較多,選擇余地廣,改變流動(dòng)相極性和pH值也對(duì)分離起到調(diào)控作用,當(dāng)選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相也可以增大分離選擇性。

  3、操作條件差別

  GC:加溫操作

  HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬?。?/p>

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